SPF 级动物实验室的运行和管理
一.制定科学规范的规章制度和操作规程
参照国家有关标准,结合我校实际情况,制定了一系列科学有效、切实可行的规章制度和标准操作规程(SOP)。主要包括《SPF 级动物实验室工作职责》、《SPF 级动物实验室日常运行管理制度》《SPF 级动物实验室动物实验管理制度》《SPF 级动物实验室大型仪器设备使用管理制度》《SPF 级动物实验室压力蒸汽灭菌器安全管理制度》等管理制度,从实验室运行规范管理、实验室环境质量控制等方面保障屏障环境达标,提高实验动物质量,保证实验结果的准确性、客观性、科学性。制定《屏障环境设施消毒与灭菌标准操作规程》《IVC 饲养设备标准操作规程》《SPF 级动物实验室高压灭菌器安全操作规程》《实验动物隔离、检疫操作规程》等规范文件,确保实验人员操作规范化、程序化和标准化,避免因人员操作不当而引起实验动物和环境污染等。制定实验动物生物安全应急预案,配置生物安全防护设备,保障科研人员人身安全。
二.实行严格有效的日常工作管理
SPF 级动物实验室作为我校重要科研平台,人员、物品、动物进出频繁,各项环境指标严格控制,时刻做到高标准、严要求,制作有“SPF 级动物实验室进出人员登记表”“SPF 级动物实验室进出物品登记表”“SPF 级动物实验室进出动物登记表”“SPF 级动物实验室高压蒸汽灭菌器灭菌记录”“SPF 级动物实验室 IVC 系统使用记录”“SPF 级动物实验室实验动物检疫记录”“SPF 级动物实验室动物实验废弃物记录”“屏障环境设施消毒记录”“ 屏障环境设施安全检查记录”等各类表格,实验动物设施日常运行管理、各类仪器使用、动物检疫饲养、实验废弃物等需要进行详细登记,记录在案。建立实验动物档案,详细记录订购动物的来源、品系、体重、数量、合格证编号等信息。
三.遵循严格的人员、物品、动物流向
进出 SPF 级动物实验室的人员、物品和动物,严格遵循单向顺时针流动原则。
人员的流向:外环境→换鞋间→更衣间→缓冲间→风淋室→洁净走廊→洁净区各功能间→污物走廊→退出缓冲间→外环境。
物品的流向:外环境→清洗消毒间→高压灭菌器、传递窗/间→洁物储存室→洁净区各功能间→污物走廊→退出缓冲间→清洗消毒间→外环境。
动物的流向:SPF 级实验动物→传递窗→动物检疫间→饲养间→污物走廊→退出缓冲间→外环境。
四.做好严格的屏障设施消毒与灭菌
防止外来微生物的入侵,保障屏障设施内的洁净度维持在合理范围内,是 SPF 级动物实验室正常运行的关键所在。定期对屏障设施进行清洁消毒灭菌,主要包括实验室消毒、进出物品消毒、人员消毒和动物饮用水消毒等。实验室消毒每周两次用 5%新洁而灭、0.5%过氧乙酸和 84 消毒液交替喷雾室内空间,无动物区域开启紫外灯消毒 30 min。进出物品消毒主要根据其物品特性不同,选择不同的消毒灭菌方法。耐高温高压的物品如动物笼具、饮水瓶、垫料、工作服、实验器械等采用 121℃,30 min 高压蒸汽灭菌;不耐高温高压和浸泡消毒的物品可喷洒消毒液后经紫外线照射 30 min 进行灭菌。人员进出实验室频繁,容易将外界病原微生物带入屏障内造成污染,因此必须严格认真做好人员消毒,进入实验室必须穿戴无菌隔离服,使用一次性帽子、口罩、手套和鞋套,同时尽可能减少人员进出的数量和频率。动物饮用水由专门纯水设备制备,经石英砂、活性炭等物质过滤消毒后供动物饮用,符合国家标准。
五.加强实验动物的准入和管理
实验动物从具有生产许可资质的单位订购,同时必须提供实验动物检测证明,包括《实验动物质量合格证》和《实验动物质量检测报告》。运输动物的笼具必须与动物等级的洁净要求相符合,并满足通风换气、搬运、码放等使用要求。实验动物进入屏障系统前先接受检查,如外包装是否按照要求包装、是否破损等。检查无误后,对动物运输笼盒进行擦拭消毒,再由传递窗进行紫外照射后,进入检验检疫室进行验收,主要检查动物的品系、数量、性别、体重(日龄)等是否与合格证相符,动物的外观和精神状态是否良好等。动物的检疫期为 1 周左右,未见异常情况则转入实验室进行实验研究。
六.加强实验人员的培训和管理
人员是最大的潜在污染源,为避免屏障环境的污染和保证实验动物质量,必须加强对人员的培训和管理。实验动物从业人员,必须通过重庆市实验动物学会举办的“实验动物从业人员培训班”的学习,在取得《重庆市实验动物从业人员培训合格证》后上岗。负责操作高压灭菌器的工作人员必须经过特种设备压力容器操作上岗的培训,取得特种设备作业人员证,做到持证上岗。在日常工作中,定期组织学习规章制度和操作规范,加强工作人员思想教育,提高职业素质及对实验动物的认识,并定期进行体检。所有人员在患病期间,尤其是感染人畜共患病的,不得进入屏障设施开展实验。定期举办多种培训,包括屏障设施准入培训,实验室安全培训,实验动物应急预案培训,相关仪器设备使用培训等。制作实验室安全手册、SPF动物实验室使用手册以及现场教学视频,供科研人员使用学习,熟悉和掌握屏障设施的特点、各项管理规章制度、实验标准操作规程及注意事项,确保实验安全顺利进行。
七.开展定期的设备检测和维护
影响屏障环境设施运行的环境因素很多,除了温湿度、气流速度、光照和噪声等环境因素外,需要定期对组合式空调机组、排风机组、风冷式冷(热)泵机组、纯水系统、高压灭菌柜等设备进行维护保养;定期对净化系统进行维护保养,根据外界环境和实际使用情况,及时清洗更换初、中、高效过滤器;每 1~2周清洗和擦拭室内回风口过滤网膜,每 3 个月全部更换;每 3 个月对风冷式冷(热)泵机组过滤网进行冲洗更换一次,防止过滤网堵塞,影响制冷(热)效果;定期对高压灭菌器和蒸汽发生器进行维护保养,每年对安全阀校正一次;定期对纯水制备系统进行维护保养,根据检测动物饮用水的微生物指标,及时更换过滤芯;定期检查空调机组、排风机组运行状态并进行记录;每日监测和记录室内温度、湿度和压力差值等参数,发现异常及时汇报,采取积极有效的应对措施,保障屏障设施各项指标维持在合理范围内。
八. 规范动物尸体及废弃物处理
实验动物尸体等废弃物可分为非感染性和感染性。感染性实验动物尸体等废弃物在进行处理前必须经过高温高压灭活等预处理;非感染性实验动物尸体等废弃物包装后分类放置在–20℃的冰柜内,由具备相关资质的企业统一处理。所有实验后的化学物品,包括过期物品,按照要求分类放在特定的回收装置内,由学校相关管理部门统一处理。通过制定科学、合理及严格的管理制度,让实验动物尸体等废弃物从产出到处置过程有章可循、有法可依,确保达到安全处置的目的,保障人员健康和环境安全。